FluorCam geschlossenes GFP/Chl. fluoreszierendes Bildgebungssystem

FluorCamDas geschlossene GFP/Chl. fluoreszierende Bildgebungssystem kann eine Reihe molekularer und zellbiologischer Studien für grüne fluoreszierende Proteine anbieten. Ein komplett softwaregesteuertes und elektrisch angetriebenes Filterrad sowie eine Reihe von Filtersätzen für die Detektion und Bildgebung von GFP, EGFP, wtGFP, YFP, BFP oder anderen Bandfluoreszierenden Proteinen und Fluoreszenten sind auf geschlossenen Fluoreszenz-Bildgebungssystemen installiert.

Das geschlossene GFP/Chl. Fluoreszenz-Bildgebungssystem FluorCam kann auch zur Erkennung dynamischer Veränderungen und räumlicher Verteilung von Chlorophyllfluoreszenz durch Pflanzen verwendet werden, zur Messung von Kautsky-Effektprozessen, Fluoreszenzschaltung und anderen momentanen Fluoreszenzprozessen (transienten) und zur Bereitstellung von 2D-Fluoreszenzbildern. Die speziell entwickelte Hardware-Konfiguration ermöglicht die automatische Umstellung des Systems in eine fluoreszierende Protein-, Fluorescenz- oder Chlorophyllfluoreszenzdetektion. Das System ist hoch integriert und kann eine dunkle Anpassung der Probe durchführen.

Anwendungsbereiche:

• Fluoreszenzdetektion von Fluoreszenzproteinen und Fluoreszenten

• Gentransfer und Biosensortechnologie

• Gen veränderte Pflanzenforschung

• Untersuchung verschiedener Genotypen

• Forschung der pflanzlich-mikrobiellen Wechselwirkungen

• Pflanzen-Tier-Interaktionsstudien

· Phytosynthetische Eigenschaften und Stoffwechselstörungen Screening

• Detektion von biologischem und nicht-biologischem Zwang

• Prüfung der Kompressivität oder Empfindlichkeit der Pflanzen

• Untersuchung der Ungleichmäßigkeit der Luftporen

• Forschung des metabolischen Chaos

• Leistungs- und Ertragsbewertung

Eigenschaften:

· Einfache Bedienung, Messproben höhenverstellbar, integrierte spezielle dunkle Anpassungsbox, um die dunkle Anpassung der gemessenen Pflanzen zu erleichtern

· Hochauflösende CCD mit einer Auflösung von bis zu 1392 x 1040 Pixel für eine schnelle und präzise Erfassung von Chlorophyllfluoreszenz und GFP

• Automatische wiederholte Bildmessungen können durchgeführt werden, ein experimentelles Programm (Protokolle) kann automatisch durchlaufende Bildmessungen eingerichtet werden, die Bildmessdaten werden automatisch auf dem Computer nach Zeitdatum gespeichert (mit Zeitstempel)

• Mit einer Vielzahl von allgemeinen Versuchsverfahren (Protokolle) wie Kautsky-Induktion, Fluoreszenz-Löschanalyse und mehr als 50 Analyseparameter

Optional mit TetraCam Farbbildungsmodul mit einer maximalen Bildfläche von 20 x 25 cm für die Blätter- oder Pflanzenmorphananalyse

Typische Proben:

• Blätter, Stängel, Samen, Wurzeln, ganze kleine Pflanzen

• Heilende Gewebe, kleine Pflanzen in Petrischalen

• Früchte und Blumen

• Blaue Bakterien, grüne Algen, Bakterien

• Gen veränderte Tiere

Technische Parameter:

• Messparameter: Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm'，Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII,NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP，QY, QY_Ln,Rfd, ETR Mehr als 50 Chlorophyl-Fluoreszenzparameter, jeder Parameter kann 2D-Fluoreszenzfarbiges Bild anzeigen

• Vollständiges automatisches Messprogramm (Protokoll), das automatische Messprogramm frei bearbeiten kann

a) Fv / Fm: Die Messparameter umfassen Fo, Fm, Fv, QY usw.

b) Kautsky-induzierter Effekt: Fluoreszenzparameter wie Fo, Fp, Fv, Ft_Lss, QY, Rfd etc.

c) Fluoreszenz-Löschanalyse: Fo, Fm, Fp, Fs, Fv, QY, ΦII, NPQ, Qp, Rfd, qL und mehr als 50 Parameter

d) Lichtreaktionskurve LC: Fo, Fm, QY, QY_Ln, ETR und andere Fluoreszenzparameter

e) PAR Absorption und NDVI (optional)

f) A Reoxidationsdynamik (optional)

g) Statische fluoreszierende Bildgebungsmessungen wie GFP

h) OJIP-schnelle Fluoreszenzdynamikanalyse (optional): Mo (Anfangsneigung der OJIP-Kurve), OJIP-Festfläche, Sm (Messung der Energie, die für das Schließen aller Lichtreaktionszentren erforderlich ist), QY, PI usw. 26 Parameter

Hochauflösender TOMI-2 CCD-Sensor

a) CCD Scannen

b) Höchste Bildauflösung: 1360 x 1024 Pixel

c) Zeitauflösung: bis zu 20 Bilder pro Sekunde bei der höchsten Bildauflösung

d) A/D-Konvertierungsoplösung: 16 Bit (65.536 Graustufen)

e) Bildgröße: 6,45 µm x 6,45 µm

f) Betriebsmodus: 1) Dynamischer Videomodus zur Messung der Chlorophyllfluoreszenzparameter; 2) Snapshotmodus zur Messung von fluoreszierenden Proteinen und fluoreszierenden Farbstoffen wie GFP

g) Kommunikationsmodus: Gigabit Ethernet

• Lichtplatte: 4 große LED-Lichtplatten mit hoher Intensität, jede Lichtplatte besteht aus einem Array von 8 x 9 LEDs, die effektive Fläche der Lichtplatte ist die gleiche wie die Bildfläche von 13 x 13 cm

• Messlicht: 617 nm rotes Licht als Standard, andere Bandoptionen, Dauer von 10 µs bis 100 µs einstellbar

• Zweifarbiges Licht: 2 rotes Licht (617 nm) + 2 blaues Licht (470 nm), Actinic1 maximale Lichtintensität 300 µmol (Photonen) / m².s, Actinic2 maximale Lichtintensität 2000 µmol (Photonen) / m².s; Maximales optisches Licht kann auf 3000 µmol (Photonen) / m².s aufgewertet werden

• Gesättigter Blitz: Maximale Lichtintensität 4000 µmol (Photonen)/m².s, kann auf 6000 µmol (Photonen)/m².s aktualisiert werden

• Bildfläche: 13 x 13 cm, für die Bildanalyse von Blättern, Pflanzengeweben, Algen, Moos, Erddecken, ganzen oder mehreren Pflanzen, 96-Loch-Platten, 384-Loch-Platten usw.

• GFP-Messmodul: 7-Bit-Filterrad und spezielle Filter zur Messung von GFP (grünes fluoreszierendes Protein)

• PAR-Absorptionsmessmodul (optional): Far Red Light 740nm (FAR), 660nm Dual-Color LEDs und spezielle Filter zur Messung von PAR-Absorption und NDVI

• QA in der oxidativdynamischen Bildverarbeitung (optional): STF-Fluoreszenzdynamik-Analysemessungen mit einer Lichtintensität von 120.000 µmol (Photonen)/m².s in 100 µs

• Modul für die schnelle Fluoreszenzdynamik von OJIP (optional): Zeitauflösung von bis zu 1 µs, kann OJIP-Kurven mit mehr als zwanzig Parametern wie Fo, Fj, Fi, P oder Fm, Vj, Vi, Mo, Area, Fix Area, Sm, Ss, N (QA Reduktion der Umlaufzahl) messen und analysieren. Phi‐‐‐_Po, Psi_o, Phi_Eo, Phi_Do, Phi_pav, ABS/RC (absorbierter Lichtquantenstrom im Reaktionszentrum), TRo/RC (absorbierter Lichtquantenstrom im Reaktionszentrum), ETo/RC (absorbierter Lichtquantenstrom im Reaktionszentrum), DIo/RC (Energieverbreitung im Reaktionszentrum), ABS/CS (absorbierter Lichtquantenstrom im Probenabschnitt), TRo/CSo, RC/CSx (Reaktionszentrumdichte), PIABS (Performance-Index oder Survival-Index basierend auf absorbiertem Lichtquantenstrom), PIcs (Performance-Index oder Survival-Index basierend auf Schnitt)

• UV-LED-Lichtplatte (optional): 365nm oder 385nm, 1) Messung der mehrfarbigen Fluoreszenz (siehe FluorCam Multispektral Fluoreszenz-Bildgebungssystem); 2) Messung von wtGFP (wildtyp grünes fluoreszierendes Protein), DAPI (4',6-Dibutyl-2-Phenylpiper, ein fluoreszierender Farbstoff)

• Blaue LED-Lichtplatte (optional): 470 nm, 1) Messung von EGFP (verstärktes grünes fluoreszierendes Protein); 2) zur Funktionsforschung der Poren

• Grüne LED-Lichtplatte (optional): 530 nm, Messung von YFP (gelbes Fluoreszenzprotein)

* Für die Messung von fluoreszierenden Proteinen wie wtGFP, DAPI, EGFP, YFP oder fluoreszierenden Farbstoffen ist ein entsprechender Filter erforderlich

• FluorCam Fluoreszenz-Bildverarbeitungssoftware: Funktionsmenüs wie Live, Protocols, Pre-processing, Result

• Kundenspezifische Protokolle: Zeit (z. B. Messdauer des Lichts, Dauer des optischen Lichts, Messdauer usw.) und Lichtintensität (z. B. Lichtintensität der optischen Lichtqualität, gesättigte Lichtintensität, Modulation des Messlichts usw.) können festgelegt werden, Spezialsprachen und Skripte für das Experiment sind verfügbar, und der Benutzer kann die Assistentvorlagen im Protokollmenü nutzen, um frei neue Experimente zu erstellen.

• Automatische Messanalyse: Ein Protokoll für die automatische unbewachte Zyklusmessung kann eingestellt werden, Wiederholungen und Intervalle können kundenspezifisch angepasst werden, Bildmessdaten werden automatisch auf dem Computer nach Zeitdatum gespeichert (mit Zeitstempel)

  Snapshot-Modus: Durch den Snapshot-Imaging-Modus können Sie die Lichtintensität, die Verschlusszeit und die Empfindlichkeit frei einstellen, um ein klares, stabiles und sofortiges fluoreszierendes Bild von Pflanzenproben zu erhalten

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• Bildvorbehandlung: Die Programmsoftware erkennt automatisch mehrere Pflanzenproben oder Bereiche oder wählt manuell die Region von Interesse (ROI) aus. Die Form der manuellen Auswahl kann quadratisch, kreisförmig, beliebige Mehrecke oder Sektoren sein. Software zur automatischen Messung und Analyse der Fluoreszenzdynamikkurven und entsprechender Parameter für jede Probe und ausgewählte Zonen, unbegrenzte Proben- oder Zonenzahl (>1000)

• Datenanalyse-Modus: Mit dem Modus "Signal-Berechnung-Nachdurchschnitt" (arithmetischer Durchschnitt) und dem Modus "Signal-Durchschnitt-Nachdurchschnitt", wählen Sie den Modus "Signal-Berechnung-Nachdurchschnitt" im Falle eines hohen Signal-Rausch-Verhältnisses aus, wählen Sie den Modus "Signal-Durchschnitt-Nachdurchschnitt" im Falle eines niedrigen Signal-Rausch-Verhältnisses aus, um Fehler durch Rausch zu filtern

• Ausgabeergebnisse: Hochzeitauflösende Fluoreszenzdynamiken, Fluoreszenzdynamiken-Änderungsvideo, Fluoreszenzparameter Excel-Dateien, Histogramme, verschiedene Parameterbildungsdiagramme, Liste der Fluoreszenzparameter mit verschiedenen ROI usw.

• Bandbreite des CCD-Detektors: 400-1000 nm

· Lichtversorgung: statisch oder dynamisch (sinus)

Spektrale Reaktion: Höchste Quanteneffizienz (70%) bei 540 nm und 50% Rückgang bei 400 nm und 650 nm

Auslesegeräusch: weniger als 12eRMS, typisch 10e

Vollständige Kapazität: mehr als 70.000 e (unbinned)

Bios: Firmware kann aktualisiert werden

• Kommunikationsmittel: Gigabit Ethernet

· Größe: 471 mm (W) × 473 mm (D) × 512 mm (H)

Gewicht: ca. 40 kg

Leistungseingang: ca. 1100 W

Versorgungsspannung: 90-240 V

Typische Anwendungen:

Das Shanghai Institute of Life Sciences verwendet FluorCam zur Messung der erhaltenen GFP-Bildgebung, die eine helle Farbe ausstrahlt, die eine Pflanze ist, die GFP ausdrückt, je mehr ihre Farbe zu roten ist, je mehr GFP sie ausdrückt.

Knopf-Korallen-Kontraktion-Ausdehnung in verschiedenen Phasen (T1 = 0, T2 = 30, T3 = 60) NDVI und GFP-Bildanalyse (Miguel, 2014)

Herkunft: Europa